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氧化应激在猪瘟病毒致病机制中的作用研究

作者: 何雷著

出版社: 中国农业出版社

出版时间: 2020-11

版次: 1

ISBN: 9787109275676

定价: 30.00

装帧: 平装

开本: 32开

纸张: 胶版纸

页数: 130页

分类: 自然科学

2 张插图图片

《氧化应激在猪瘟病毒致病机制中的作用研究》共包括六部分内容。首部分主要阐述了氧化应激的定义、影响因素及氧化应激在病毒性疾病中作用的研究进展。第二部分对猪瘟病毒的基因组成、蛋白功能等基本生物学特征进行了介绍，侧重总结了与氧化应激有关的病毒蛋白的功能及相关的研究进展。第三部分通过检测氧化应激的标志性产物ROS的产生和与氧化应激有关的调节蛋白Trx等的表达水平变化，首次明确了CSFV引起其宿主细胞血管内皮细胞发生氧化应激。第四部分至第六部分，进一步明确CSFVNS5A蛋白是CSFV发生氧化应激的主要病毒蛋白，并通过蛋白分段表达，酵母双杂交等方法发现了28个与NS5A蛋白相互作用的胞内蛋白，为探明CSFV及其NS5A蛋白引起氧化应激的胞内网络奠定了基础。何雷，博士，河南科技大学动物科技学院讲师，主要从事畜禽病毒性疾病致病机制及疫苗研发等研究工作，于西北农林科技大学完成硕士与博士学位学习后，在美国农业部东南家禽研究所做访问学者1年，主持国家自然基金项目1项，参与2项；主持省科技攻关课题1项，参编《鸭鹅常见病特征及防控知识集要》等图书，在国内外期刊发表学术论文30余篇。前言
第一章绪论
第一节氧化应激在疾病中的作用研究进展
一、氧化应激引起的细胞功能损伤的胞内变化特征
二、氧化应激在病毒性疾病中的作用
第二节猪瘟病毒的研究进展
一、猪瘟病毒
二、猪瘟病毒的基因组
三、猪瘟病毒蛋白的结构和功能
四、猪瘟病毒NS5A蛋白功能的研究进展

第二章猪瘟病毒感染引起宿主细胞发生氧化应激
第一节材料和方法
一、病毒、菌株、细胞及载体
二、主要试剂及耗材
三、主要仪器及设备
四、方法
第二节结果
一、CSFV刺激SUVEC发生氧化应激
二、CSFV引起抗氧化应激蛋白表达水平的变化
三、CSFV NS5A引起炎症相关蛋白表达水平的变化
四、抗氧化剂对CSFV增殖影响的检测
第三节讨论与结论
一、讨论
二、结论

第三章猪瘟病毒NS5A蛋白亚细胞定位及表达NS5A蛋白细胞株的建立
第一节材料和方法
一、病毒、菌株、细胞及载体
二、主要试剂及耗材
三、主要仪器及设备
四、方法
第二节结果
一、CSFV NS5A基因的扩增与生物信息学分析
二、CSFV NS5A真核表达载体的构建与鉴定
三、表达CSFV NS5A蛋白细胞株的建立和鉴定
四、CSFV NS5A蛋白的亚细胞定位
第三节讨论与结论
一、讨论
二、结论

第四章 CSFV NS5A蛋白引起SUVEC发生氧化应激
第一节材料和方法
一、病毒、菌株、细胞及载体
二、主要试剂及耗材
三、主要仪器及设备
四、方法
第二节结果
一、活性氧ROS水平的荧光检测
二、CSFV NS5A刺激SUVEC发生氧化应激
三、CSFV NS5A引起抗氧化应激蛋白的表达水平变化
四、CSFV NS5A引起炎症相关蛋白的表达水平变化
第三节讨论与结论
一、讨论
二、结论

第五章 CSFV NS5A蛋白的功能分区的研究
第一节材料和方法
一、病毒、菌株、细胞及载体
二、主要试剂及耗材
三、主要仪器及设备
四、方法
第二节结果
一、CSFV刺激SUVEC发生氧化应激CSFV NS5A亚基因的扩增
二、CSFV NS5A亚基因的真核表达载体的构建
三、CSFV NS5A亚克隆的细胞转染和荧光观察
四、CSFV NS5A 5个亚克隆的亚细胞定位
五、CSFV NS5A 5个亚克隆在刺激SUVEC发生氧化应激中的作用
六、CSFV NS5A 5个亚克隆引起抗氧化应激蛋白的表达水平变化
第三节讨论与结论
一、讨论
二、结论

第六章酵母双杂交寻找与CSFV NS5A蛋白相互作用的胞内蛋白
第一节材料和方法
一、病毒、酵母杂技系统等
二、主要试剂及耗材
三、主要仪器及设备
四、方法
第二节结果
一、诱饵质粒PGBKT7-NS5A质粒的载体构建
二、pGBKT7-NS5A质粒的酵母菌转化和鉴定
三、pGBKT7-NS5A质粒与pGADT-SUVEC质粒的共转化
四、阳性克隆筛选结果
五、阳性酵母克隆的质粒提取和PCR鉴定结果
六、阳性酵母克隆的PCR片段的基因比对结果
第三节讨论与结论
一、讨论
二、结论
参考文献
内容简介:
《氧化应激在猪瘟病毒致病机制中的作用研究》共包括六部分内容。首部分主要阐述了氧化应激的定义、影响因素及氧化应激在病毒性疾病中作用的研究进展。第二部分对猪瘟病毒的基因组成、蛋白功能等基本生物学特征进行了介绍，侧重总结了与氧化应激有关的病毒蛋白的功能及相关的研究进展。第三部分通过检测氧化应激的标志性产物ROS的产生和与氧化应激有关的调节蛋白Trx等的表达水平变化，首次明确了CSFV引起其宿主细胞血管内皮细胞发生氧化应激。第四部分至第六部分，进一步明确CSFVNS5A蛋白是CSFV发生氧化应激的主要病毒蛋白，并通过蛋白分段表达，酵母双杂交等方法发现了28个与NS5A蛋白相互作用的胞内蛋白，为探明CSFV及其NS5A蛋白引起氧化应激的胞内网络奠定了基础。
作者简介:
何雷，博士，河南科技大学动物科技学院讲师，主要从事畜禽病毒性疾病致病机制及疫苗研发等研究工作，于西北农林科技大学完成硕士与博士学位学习后，在美国农业部东南家禽研究所做访问学者1年，主持国家自然基金项目1项，参与2项；主持省科技攻关课题1项，参编《鸭鹅常见病特征及防控知识集要》等图书，在国内外期刊发表学术论文30余篇。
目录:
前言
第一章绪论
第一节氧化应激在疾病中的作用研究进展
一、氧化应激引起的细胞功能损伤的胞内变化特征
二、氧化应激在病毒性疾病中的作用
第二节猪瘟病毒的研究进展
一、猪瘟病毒
二、猪瘟病毒的基因组
三、猪瘟病毒蛋白的结构和功能
四、猪瘟病毒NS5A蛋白功能的研究进展

第二章猪瘟病毒感染引起宿主细胞发生氧化应激
第一节材料和方法
一、病毒、菌株、细胞及载体
二、主要试剂及耗材
三、主要仪器及设备
四、方法
第二节结果
一、CSFV刺激SUVEC发生氧化应激
二、CSFV引起抗氧化应激蛋白表达水平的变化
三、CSFV NS5A引起炎症相关蛋白表达水平的变化
四、抗氧化剂对CSFV增殖影响的检测
第三节讨论与结论
一、讨论
二、结论

第三章猪瘟病毒NS5A蛋白亚细胞定位及表达NS5A蛋白细胞株的建立
第一节材料和方法
一、病毒、菌株、细胞及载体
二、主要试剂及耗材
三、主要仪器及设备
四、方法
第二节结果
一、CSFV NS5A基因的扩增与生物信息学分析
二、CSFV NS5A真核表达载体的构建与鉴定
三、表达CSFV NS5A蛋白细胞株的建立和鉴定
四、CSFV NS5A蛋白的亚细胞定位
第三节讨论与结论
一、讨论
二、结论

第四章 CSFV NS5A蛋白引起SUVEC发生氧化应激
第一节材料和方法
一、病毒、菌株、细胞及载体
二、主要试剂及耗材
三、主要仪器及设备
四、方法
第二节结果
一、活性氧ROS水平的荧光检测
二、CSFV NS5A刺激SUVEC发生氧化应激
三、CSFV NS5A引起抗氧化应激蛋白的表达水平变化
四、CSFV NS5A引起炎症相关蛋白的表达水平变化
第三节讨论与结论
一、讨论
二、结论

第五章 CSFV NS5A蛋白的功能分区的研究
第一节材料和方法
一、病毒、菌株、细胞及载体
二、主要试剂及耗材
三、主要仪器及设备
四、方法
第二节结果
一、CSFV刺激SUVEC发生氧化应激CSFV NS5A亚基因的扩增
二、CSFV NS5A亚基因的真核表达载体的构建
三、CSFV NS5A亚克隆的细胞转染和荧光观察
四、CSFV NS5A 5个亚克隆的亚细胞定位
五、CSFV NS5A 5个亚克隆在刺激SUVEC发生氧化应激中的作用
六、CSFV NS5A 5个亚克隆引起抗氧化应激蛋白的表达水平变化
第三节讨论与结论
一、讨论
二、结论

第六章酵母双杂交寻找与CSFV NS5A蛋白相互作用的胞内蛋白
第一节材料和方法
一、病毒、酵母杂技系统等
二、主要试剂及耗材
三、主要仪器及设备
四、方法
第二节结果
一、诱饵质粒PGBKT7-NS5A质粒的载体构建
二、pGBKT7-NS5A质粒的酵母菌转化和鉴定
三、pGBKT7-NS5A质粒与pGADT-SUVEC质粒的共转化
四、阳性克隆筛选结果
五、阳性酵母克隆的质粒提取和PCR鉴定结果
六、阳性酵母克隆的PCR片段的基因比对结果
第三节讨论与结论
一、讨论
二、结论
参考文献

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