细胞免疫学实验研究方法

细胞免疫学实验研究方法
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作者:
2009-07
版次: 1
ISBN: 9787509127131
定价: 188.00
装帧: 平装
开本: 大16开
纸张: 胶版纸
页数: 218页
字数: 397千字
正文语种: 简体中文
分类: 医药卫生
  •   《细胞免疫学实验研究方法》共19章,详细介绍了实验室基本设施、仪器设备、实验器材清洗消毒、试剂配制,细胞的提取、纯化、培养及与细胞免疫相关的生物学活性实验技术和研究方法。《细胞免疫学实验研究方法》内容丰富、方法先进,并附有大量图解,操作简便易行,可作为普通高等医学院校本科生与研究生的实验辅助教材和工具书,也适用于临床检验和相关实验研究人员阅读参考。   孙黎飞,江苏省徐州市人。1969年入伍,毕业于上海第二军医大学。
      现任济南军区第148医院肿瘤诊疗中心主任、硕士研究生导师、主任医师。医学硕士,济南军区专业技术拔尖人才。从事肿瘤免疫与血液病的实验室诊断与临床工作20余年,在肿瘤免疫与血液免疫和血液病实验诊断与临床治疗方面有较高的造诣。曾荣获全军和省部级科技进步奖、医疗成果二等奖和三等奖共6项。荣立三等功1次。兼任济南军区肿瘤专业委员会副主任委员、血液病专业委员会常务委员,淄博市医学会肿瘤专业委员会副主任委员、血液病专业委员会副主任委员,淄博市医学会特聘医疗事故鉴定专家。 第1章细胞免疫实验的设施和基本条件/1
    第一节常用无菌操作设施/1
    第二节常用实验室设备与器械/2
    第三节培养免疫细胞常用的器皿/6

    第2章培养器皿的清洗、包装与消毒/9
    第3章细胞培养用液/12
    第一节平衡盐溶液/12
    第二节常用细胞培养基和血清制备/18
    第三节其他常用培养液/20

    第4章制备免疫细胞悬液/22
    第一节实验所需的材料和试剂/22
    第二节制备单个核细胞悬液/23
    第三节去除细胞悬液中的红细胞/25
    第四节去除死细胞的方法/25
    第五节细胞计数/26
    第六节计算细胞活性/27

    第5章分离与纯化免疫细胞/28
    第一节分离人外周血细胞/28
    第二节分离和纯化B淋巴细胞/30
    第三节分离和纯化T淋巴细胞/34
    第四节纯化免疫细胞亚群/36
    第五节分离单核细胞一巨噬细胞/38
    第六节分离和纯化组织中的巨噬细胞/40
    第七节培养树突状细胞的方法/42

    第6章建立免疫细胞克隆/45
    第一节建立特异性T细胞株或T细胞克隆/45
    第二节利用小鼠脾细胞制备T细胞克隆/47
    第三节制备人T细胞克隆/50
    第四节建立人B细胞克隆/53
    第五节筛选单克隆细胞/54
    第六节细胞的培养冻存与复苏方法/55

    第7章造血干细胞的培养技术/58
    第一节配制骨髓细胞培养试剂/59
    第二节分离与纯化骨髓细胞/61
    第三节小鼠骨髓细胞集落形成试验/64
    第四节人骨髓和外周血造血干细胞的培养方法/68

    第8章用流式细胞仪检测免疫细胞/71
    第一节免疫细胞表面分化抗原和黏附分子/71
    第二节流式细胞术常用的染料和标记抗体/74
    第三节选择染色的方法和封闭免疫细胞的Fc受体/77
    第四节用流式细胞仪检测免疫细胞表面分子/79
    第五节检测免疫细胞钙离子流入的方法/80
    第六节检测免疫细胞活化的方法/81
    第七节检测免疫细胞周期的方法/83

    第9章免疫细胞的增殖实验/85
    第一节反映DNA合成的细胞增殖实验/85
    第二节反映免疫细胞能量代谢的增殖实验/88

    第10章免疫细胞的趋化活性和抗原提呈实验/91
    第一节免疫细胞趋化实验/91
    第二节专职抗原提呈细胞的抗原提呈实验/93

    第11章免疫细胞的细胞毒活性实验/96
    第一节抗体依赖细胞介导的细胞毒性实验(ADCC)/97
    第二节非抗体依赖细胞介导的细胞毒性实验/98
    第三节巨噬细胞活性实验/105

    第12章细胞凋亡实验/110
    第一节概论/110
    第二节检测凋亡细胞的DNA碎片/112
    第三节检测凋亡细胞的核小体与膜变异/114
    第四节检测凋亡相关蛋白/115

    第13章制备和修饰抗体/119
    第一节选择和修饰免疫原/119
    第二节选择动物和免疫佐剂/123
    第三节免疫的程序/123
    第四节单克隆抗体与杂交瘤技术/124

    第14章检测与鉴定抗体的方法/131
    第一节检测抗体免疫实验常用的器材与基本条件/131
    第二节标记抗原和抗体/131
    第三节常用检测抗原与抗体的免疫方法/135
    第四节免疫沉淀法和Western印迹实验/140
    第五节测定抗体的结合能力和蛋白质含量/147

    第15章检测单个B淋巴细胞分泌抗体/151
    第一节溶血空斑试验/151
    第二节酶联免疫方法检测单个淋巴细胞分泌抗体功能/155
    第三节抗半抗原方法/156

    第16章纯化免疫球蛋白/159
    第一节纯化免疫球蛋白IgG/159
    第二节纯化免疫球蛋白IgM/162
    第三节用亲和层析纯化半抗原抗体/164
    第四节消化免疫球蛋白/164
    第五节检测特异性抗原抗体的活性/168

    第17章检测免疫细胞分泌的细胞因子/169
    第一节概论/169
    第二节白细胞介素-1/171
    第三节白细胞介素-2/173
    第四节白细胞介素-3/175
    第五节白细胞介素-4/177
    第六节白细胞介素-5/178
    第七节白细胞介素-6/179
    第八节白细胞介素-7/181
    第九节白细胞介素-9/182
    第十节白细胞介素-10/183
    第十一节白细胞介素-11/185
    第十二节白细胞介素-12/186
    第十三节白细胞介素-13/188
    第四节白细胞介素-14/190
    第五节白细胞介素-15/190
    第十六节白细胞介素-16/191
    第十七节白细胞介素-17/191
    第十八节白细胞介素-18/192
    第十九节白细胞介素-8和趋化因子家族/192
    第二十节白细胞介素家族的新成员/192
    第二十一节肿瘤坏死因子/195
    第二十二节干扰素/197
    第二十三节集落刺激因子/202
    第二十四节免疫测定法检测细胞因子/203
    第二十五节计算免疫细胞分泌细胞因子活性单位的方法/206

    第18章细胞因子受体检测/207
    第一节概论/207
    第二节研究细胞因子受体的方法/208

    第19章检测免疫细胞信号转导分子/214
    第一节检测免疫细胞核转录调节因子/214
    第二节检测免疫细胞cAMP/216
    第三节流式细胞仪检测免疫细胞内钙离子释放/217
    参考文献/219
  • 内容简介:
      《细胞免疫学实验研究方法》共19章,详细介绍了实验室基本设施、仪器设备、实验器材清洗消毒、试剂配制,细胞的提取、纯化、培养及与细胞免疫相关的生物学活性实验技术和研究方法。《细胞免疫学实验研究方法》内容丰富、方法先进,并附有大量图解,操作简便易行,可作为普通高等医学院校本科生与研究生的实验辅助教材和工具书,也适用于临床检验和相关实验研究人员阅读参考。
  • 作者简介:
      孙黎飞,江苏省徐州市人。1969年入伍,毕业于上海第二军医大学。
      现任济南军区第148医院肿瘤诊疗中心主任、硕士研究生导师、主任医师。医学硕士,济南军区专业技术拔尖人才。从事肿瘤免疫与血液病的实验室诊断与临床工作20余年,在肿瘤免疫与血液免疫和血液病实验诊断与临床治疗方面有较高的造诣。曾荣获全军和省部级科技进步奖、医疗成果二等奖和三等奖共6项。荣立三等功1次。兼任济南军区肿瘤专业委员会副主任委员、血液病专业委员会常务委员,淄博市医学会肿瘤专业委员会副主任委员、血液病专业委员会副主任委员,淄博市医学会特聘医疗事故鉴定专家。
  • 目录:
    第1章细胞免疫实验的设施和基本条件/1
    第一节常用无菌操作设施/1
    第二节常用实验室设备与器械/2
    第三节培养免疫细胞常用的器皿/6

    第2章培养器皿的清洗、包装与消毒/9
    第3章细胞培养用液/12
    第一节平衡盐溶液/12
    第二节常用细胞培养基和血清制备/18
    第三节其他常用培养液/20

    第4章制备免疫细胞悬液/22
    第一节实验所需的材料和试剂/22
    第二节制备单个核细胞悬液/23
    第三节去除细胞悬液中的红细胞/25
    第四节去除死细胞的方法/25
    第五节细胞计数/26
    第六节计算细胞活性/27

    第5章分离与纯化免疫细胞/28
    第一节分离人外周血细胞/28
    第二节分离和纯化B淋巴细胞/30
    第三节分离和纯化T淋巴细胞/34
    第四节纯化免疫细胞亚群/36
    第五节分离单核细胞一巨噬细胞/38
    第六节分离和纯化组织中的巨噬细胞/40
    第七节培养树突状细胞的方法/42

    第6章建立免疫细胞克隆/45
    第一节建立特异性T细胞株或T细胞克隆/45
    第二节利用小鼠脾细胞制备T细胞克隆/47
    第三节制备人T细胞克隆/50
    第四节建立人B细胞克隆/53
    第五节筛选单克隆细胞/54
    第六节细胞的培养冻存与复苏方法/55

    第7章造血干细胞的培养技术/58
    第一节配制骨髓细胞培养试剂/59
    第二节分离与纯化骨髓细胞/61
    第三节小鼠骨髓细胞集落形成试验/64
    第四节人骨髓和外周血造血干细胞的培养方法/68

    第8章用流式细胞仪检测免疫细胞/71
    第一节免疫细胞表面分化抗原和黏附分子/71
    第二节流式细胞术常用的染料和标记抗体/74
    第三节选择染色的方法和封闭免疫细胞的Fc受体/77
    第四节用流式细胞仪检测免疫细胞表面分子/79
    第五节检测免疫细胞钙离子流入的方法/80
    第六节检测免疫细胞活化的方法/81
    第七节检测免疫细胞周期的方法/83

    第9章免疫细胞的增殖实验/85
    第一节反映DNA合成的细胞增殖实验/85
    第二节反映免疫细胞能量代谢的增殖实验/88

    第10章免疫细胞的趋化活性和抗原提呈实验/91
    第一节免疫细胞趋化实验/91
    第二节专职抗原提呈细胞的抗原提呈实验/93

    第11章免疫细胞的细胞毒活性实验/96
    第一节抗体依赖细胞介导的细胞毒性实验(ADCC)/97
    第二节非抗体依赖细胞介导的细胞毒性实验/98
    第三节巨噬细胞活性实验/105

    第12章细胞凋亡实验/110
    第一节概论/110
    第二节检测凋亡细胞的DNA碎片/112
    第三节检测凋亡细胞的核小体与膜变异/114
    第四节检测凋亡相关蛋白/115

    第13章制备和修饰抗体/119
    第一节选择和修饰免疫原/119
    第二节选择动物和免疫佐剂/123
    第三节免疫的程序/123
    第四节单克隆抗体与杂交瘤技术/124

    第14章检测与鉴定抗体的方法/131
    第一节检测抗体免疫实验常用的器材与基本条件/131
    第二节标记抗原和抗体/131
    第三节常用检测抗原与抗体的免疫方法/135
    第四节免疫沉淀法和Western印迹实验/140
    第五节测定抗体的结合能力和蛋白质含量/147

    第15章检测单个B淋巴细胞分泌抗体/151
    第一节溶血空斑试验/151
    第二节酶联免疫方法检测单个淋巴细胞分泌抗体功能/155
    第三节抗半抗原方法/156

    第16章纯化免疫球蛋白/159
    第一节纯化免疫球蛋白IgG/159
    第二节纯化免疫球蛋白IgM/162
    第三节用亲和层析纯化半抗原抗体/164
    第四节消化免疫球蛋白/164
    第五节检测特异性抗原抗体的活性/168

    第17章检测免疫细胞分泌的细胞因子/169
    第一节概论/169
    第二节白细胞介素-1/171
    第三节白细胞介素-2/173
    第四节白细胞介素-3/175
    第五节白细胞介素-4/177
    第六节白细胞介素-5/178
    第七节白细胞介素-6/179
    第八节白细胞介素-7/181
    第九节白细胞介素-9/182
    第十节白细胞介素-10/183
    第十一节白细胞介素-11/185
    第十二节白细胞介素-12/186
    第十三节白细胞介素-13/188
    第四节白细胞介素-14/190
    第五节白细胞介素-15/190
    第十六节白细胞介素-16/191
    第十七节白细胞介素-17/191
    第十八节白细胞介素-18/192
    第十九节白细胞介素-8和趋化因子家族/192
    第二十节白细胞介素家族的新成员/192
    第二十一节肿瘤坏死因子/195
    第二十二节干扰素/197
    第二十三节集落刺激因子/202
    第二十四节免疫测定法检测细胞因子/203
    第二十五节计算免疫细胞分泌细胞因子活性单位的方法/206

    第18章细胞因子受体检测/207
    第一节概论/207
    第二节研究细胞因子受体的方法/208

    第19章检测免疫细胞信号转导分子/214
    第一节检测免疫细胞核转录调节因子/214
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