高等院校生命科学与技术实验教材：分子生物学与基因工程实验教程
出版时间:
2013-06
版次:
1
ISBN:
9787302322610
定价:
15.00
装帧:
平装
开本:
16开
纸张:
胶版纸
页数:
61页
字数:
64千字
正文语种:
简体中文
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《高等院校生命科学与技术实验教材：分子生物学与基因工程实验教程》由两大部分十大实验组成，包括质粒提取、核酸回收、载体连接、PCR进行克隆鉴定、SDS-PAGE以及Westernblot等。在系统进行一个基因克隆的同时让学生全面掌握质粒、限制性内切酶、连接酶、感受态、转化PCR、重组蛋白表达及鉴定等基本操作；从而使学生巩固基因工程学理论知识，并为将来进一步学习打下技术基础。 第1部分基因工程实验
实验1重组质粒pcDNA3.0-ARRB的提取，质量检测及酶切分析
1.1质粒提取
1.2质粒质量检测
1.3质粒酶切
1.4琼脂糖凝胶电泳检测
实验2用琼脂糖凝胶电泳进行目的DNA片段的回收及质量检测
1.1用琼脂糖凝胶电泳进行目的DNA片段的分离
1.2从凝胶中回收目的DNA片段
1.3DNA片段浓度及纯度检测
实验3目的DNA片段与载体连接，感受态制备及连接产物的转化
1.1连接反应
1.2感受态制备
1.3连接产物转化感受态细菌
实验4PCR鉴定细菌克隆
1.1PCR鉴定克隆
1.2琼脂糖凝胶电泳
实验5SDS-PAGE电泳及考马斯亮蓝染色分析目的蛋白的表达
1.1电泳胶的制备
1.2蛋白样品制备及SDS-PAGE电泳
1.3转膜
1.4考马斯亮蓝染色
实验6Westernblot分析目的蛋白的表达
1.1SDS-PAGE电泳
1.2转膜
1.3封闭
1.4一抗孵育
1.5二抗孵育
1.6显色
第2部分分子生物学实验
实验7大肠杆菌基因组DNA的提取与定量
实验8大肠杆菌生物素连接酶基因的RCR扩增及扩增产物的鉴定
实验9小鼠肝组织中总RNA的提取
实验10逆转录·聚合酶链反应（RT-PCR）
附录材料
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内容简介:
《高等院校生命科学与技术实验教材：分子生物学与基因工程实验教程》由两大部分十大实验组成，包括质粒提取、核酸回收、载体连接、PCR进行克隆鉴定、SDS-PAGE以及Westernblot等。在系统进行一个基因克隆的同时让学生全面掌握质粒、限制性内切酶、连接酶、感受态、转化PCR、重组蛋白表达及鉴定等基本操作；从而使学生巩固基因工程学理论知识，并为将来进一步学习打下技术基础。
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目录:
第1部分基因工程实验
实验1重组质粒pcDNA3.0-ARRB的提取，质量检测及酶切分析
1.1质粒提取
1.2质粒质量检测
1.3质粒酶切
1.4琼脂糖凝胶电泳检测
实验2用琼脂糖凝胶电泳进行目的DNA片段的回收及质量检测
1.1用琼脂糖凝胶电泳进行目的DNA片段的分离
1.2从凝胶中回收目的DNA片段
1.3DNA片段浓度及纯度检测
实验3目的DNA片段与载体连接，感受态制备及连接产物的转化
1.1连接反应
1.2感受态制备
1.3连接产物转化感受态细菌
实验4PCR鉴定细菌克隆
1.1PCR鉴定克隆
1.2琼脂糖凝胶电泳
实验5SDS-PAGE电泳及考马斯亮蓝染色分析目的蛋白的表达
1.1电泳胶的制备
1.2蛋白样品制备及SDS-PAGE电泳
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1.4考马斯亮蓝染色
实验6Westernblot分析目的蛋白的表达
1.1SDS-PAGE电泳
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1.3封闭
1.4一抗孵育
1.5二抗孵育
1.6显色
第2部分分子生物学实验
实验7大肠杆菌基因组DNA的提取与定量
实验8大肠杆菌生物素连接酶基因的RCR扩增及扩增产物的鉴定
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实验10逆转录·聚合酶链反应（RT-PCR）
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