生物化学与分子生物学实验教程

生物化学与分子生物学实验教程
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作者: ,
出版社: 科学出版社
2021-08
版次: 1
ISBN: 9787030688064
定价: 29.80
装帧: 平装
开本: 16开
纸张: 胶版纸
页数: 90页
分类: 自然科学
  • 《生物化学与分子生物学实验教程》分四章:第一章为实验须知;第二章介绍常用实验技术和方法,包括如何设置对照、吸量管的种类及使用、离心技术、分光光度技术、电泳技术、层析技术等;第三章是基本实验项目,通过基本实验增强学生对理论内容的理解,学会生物化学与分子生物学实验中常见的技术方法,培养学生的基本实验操作能力;第四章为综合性实验,这部分实验可培养学生综合分析和解决问题的能力。 目录 

    第一章 实验须知 1 

    一、实验要求 1 

    二、实验报告要求 1 

    三、药品、试剂使用要求 2 

    四、实验安全注意事项 2 

    五、实验室清洁 3 

    第二章 常用实验技术和方法 4 

    一、实验对照的设置 4 

    二、吸量管的种类及使用 5 

    三、离心技术 7 

    四、分光光度技术 8 

    五、电泳技术 11 

    六、层析技术 13 

    第三章 基本实验项目 15 

    实验一 蛋白质的沉淀反应 15 

    实验二 蛋白质的两性反应和等电点测定 17 

    实验三 血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳 18 

    实验四 蛋白质定量实验 20 

    一、Folin-酚试剂法(Lowry法) 20 

    二、考马斯亮蓝染色法 22 

    三、BCA法 23 

    四、紫外分光光度测定法 24 

    实验五 凝胶层析分离血红蛋白和鱼精蛋白 25 

    实验六 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质分子量 27 

    实验七 氨基酸的薄层层析 32 

    实验八 核酸的定量测定 34 

    一、紫外吸收法 34 

    二、DNA的定量测定――二苯胺法 35 

    三、RNA的定量测定――地衣酚法 36 

    实验九 酵母RNA的提取及组分的鉴定 37 

    实验十 核酸的琼脂糖凝胶电泳 38 

    一、DNA的琼脂糖凝胶电泳 38 

    二、RNA的甲醛变性凝胶电泳 40 

    实验十一 影响酶活性的因素 42 

    一、温度对酶活性的影响 42 

    二、pH对酶活性的影响 43 

    三、激动剂和抑制剂对酶活性的影响 44 

    实验十二 丙二酸对琥珀酸脱氢酶活性的影响 45 

    实验十三 酶的米氏常数(Km)测定 47 

    一、碱性磷酸酶Km值的测定(双倒数作图法) 47 

    二、过氧化氢酶Km值测定(Hanes-Woolf作图法) 50 

    实验十四 乳酸脱氢酶的组分及作用 53 

    实验十五 血中葡萄糖含量的测定(邻甲苯胺法) 54 

    实验十六 饥饿和饱食对肝糖原含量的影响 56 

    实验十七 运动对乳酸含量的影响 57 

    一、运动对血中乳酸含量的影响 58 

    二、运动对尿乳酸含量的影响 59 

    实验十八 血清甘油三酯的测定 60 

    实验十九 血清总胆固醇含量测定 62 

    实验二十 酮体的生成与定性 64 

    实验二十一 转氨基作用(圆形纸层析鉴定) 65 

    第四章 综合性实验 70 

    实验二十二 血清白蛋白、γ球蛋白的分离纯化与鉴定 70 

    实验二十三 碱性磷酸酶的分离纯化和比活性测定 73 

    实验二十四 大肠杆菌感受态细胞的制备及转化实验 77 

    实验二十五 碱裂解法提取质粒DNA 78 

    实验二十六 限制性内切核酸酶对质粒DNA的酶切 80 

    实验二十七 PCR扩增目的基因及鉴定 81 

    实验二十八 蛋白质印迹实验 84 

    主要参考文献 90
  • 内容简介:
    《生物化学与分子生物学实验教程》分四章:第一章为实验须知;第二章介绍常用实验技术和方法,包括如何设置对照、吸量管的种类及使用、离心技术、分光光度技术、电泳技术、层析技术等;第三章是基本实验项目,通过基本实验增强学生对理论内容的理解,学会生物化学与分子生物学实验中常见的技术方法,培养学生的基本实验操作能力;第四章为综合性实验,这部分实验可培养学生综合分析和解决问题的能力。
  • 目录:
    目录 

    第一章 实验须知 1 

    一、实验要求 1 

    二、实验报告要求 1 

    三、药品、试剂使用要求 2 

    四、实验安全注意事项 2 

    五、实验室清洁 3 

    第二章 常用实验技术和方法 4 

    一、实验对照的设置 4 

    二、吸量管的种类及使用 5 

    三、离心技术 7 

    四、分光光度技术 8 

    五、电泳技术 11 

    六、层析技术 13 

    第三章 基本实验项目 15 

    实验一 蛋白质的沉淀反应 15 

    实验二 蛋白质的两性反应和等电点测定 17 

    实验三 血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳 18 

    实验四 蛋白质定量实验 20 

    一、Folin-酚试剂法(Lowry法) 20 

    二、考马斯亮蓝染色法 22 

    三、BCA法 23 

    四、紫外分光光度测定法 24 

    实验五 凝胶层析分离血红蛋白和鱼精蛋白 25 

    实验六 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质分子量 27 

    实验七 氨基酸的薄层层析 32 

    实验八 核酸的定量测定 34 

    一、紫外吸收法 34 

    二、DNA的定量测定――二苯胺法 35 

    三、RNA的定量测定――地衣酚法 36 

    实验九 酵母RNA的提取及组分的鉴定 37 

    实验十 核酸的琼脂糖凝胶电泳 38 

    一、DNA的琼脂糖凝胶电泳 38 

    二、RNA的甲醛变性凝胶电泳 40 

    实验十一 影响酶活性的因素 42 

    一、温度对酶活性的影响 42 

    二、pH对酶活性的影响 43 

    三、激动剂和抑制剂对酶活性的影响 44 

    实验十二 丙二酸对琥珀酸脱氢酶活性的影响 45 

    实验十三 酶的米氏常数(Km)测定 47 

    一、碱性磷酸酶Km值的测定(双倒数作图法) 47 

    二、过氧化氢酶Km值测定(Hanes-Woolf作图法) 50 

    实验十四 乳酸脱氢酶的组分及作用 53 

    实验十五 血中葡萄糖含量的测定(邻甲苯胺法) 54 

    实验十六 饥饿和饱食对肝糖原含量的影响 56 

    实验十七 运动对乳酸含量的影响 57 

    一、运动对血中乳酸含量的影响 58 

    二、运动对尿乳酸含量的影响 59 

    实验十八 血清甘油三酯的测定 60 

    实验十九 血清总胆固醇含量测定 62 

    实验二十 酮体的生成与定性 64 

    实验二十一 转氨基作用(圆形纸层析鉴定) 65 

    第四章 综合性实验 70 

    实验二十二 血清白蛋白、γ球蛋白的分离纯化与鉴定 70 

    实验二十三 碱性磷酸酶的分离纯化和比活性测定 73 

    实验二十四 大肠杆菌感受态细胞的制备及转化实验 77 

    实验二十五 碱裂解法提取质粒DNA 78 

    实验二十六 限制性内切核酸酶对质粒DNA的酶切 80 

    实验二十七 PCR扩增目的基因及鉴定 81 

    实验二十八 蛋白质印迹实验 84 

    主要参考文献 90
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